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紅細胞微核計數的正確操作和注意事項
更新時間:2024-04-15   點擊次數:3061次
  紅細胞微核計數系統專為遺傳毒理大數據設計,適用Giemsa染色的哺乳動物骨髓或外周血紅細胞微核試驗。通過對嗜多染紅細胞(PCE)的智能學習,采用隨機共振技術,幾十秒即可從上百張混有各類細胞的顯微影像中抓取2000個PCE細胞并識別微核,自動計算含微核細胞率。
  紅細胞微核計數操作和注意事項
  1.清潔:應保證計數板和蓋玻片清潔。操作時,勿接觸計數板表面,以防污染。使用后,依次用95%乙醇、蒸餾水棉球、清潔綢布擦凈。
  2.充池:需一次完成充池,如充池過少、過多或有氣泡、繼續充液,應重新操作,充池后不能移動蓋玻片。紅細胞在計數池中若分布不均,每個中方格間相差超過20個應重新充池,兩次紅細胞計數相差不得超過5%.
  3.計數板:改良牛鮑計數板每年要鑒定1次,以免影響計數結果的準確性。
  4.白細胞影響:通常白細胞總數較少,僅相當于紅細胞的1/500~1/1000,對結果影響很小,可以忽略不計。但白細胞過高者(WBC>100×109/L),紅細胞計數結果應進行校正。方法有兩種:一是直接將患者紅細胞數減去白細胞數,二是在高倍鏡下觀察勿將白細胞計入,白細胞體積常比紅細胞略大,中央無凹陷,細胞核隱約可見,無黃綠色折光。
  5.紅細胞稀釋液:傳統稀釋液(Hayem液)由NaCl(氯化鈉,調節滲透壓)、Na2S04.10H2O(結晶硫酸鈉,提高比密防止細胞粘連)、HgCl2.和蒸餾水組成。枸櫞酸鈉稀釋液由枸櫞酸鈉(抗凝和維持滲透壓)、甲醛(防腐和固定紅細胞)、氯化鈉(調節滲透壓)和蒸餾水組成。普通生理鹽水或加1%甲醛生理鹽水。
 

 

  紅細胞微核計數微核試驗是檢測染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個染色體,在細胞分裂后期仍留在子細胞的胞質內成為微核。較常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞(PCE)微核試驗。以受試物處理嚙齒類動物,然后處死,取骨髓,制片、固定、染色,于顯微鏡下計數PCE中的微核。

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