平板菌落計數法對于活菌檢測存在的重要意義
更新時間:2024-03-27 文章更新于2024-03-27 點擊次數:4138次
平板菌落計數法被廣泛應用于生物制品檢驗、食品以及飲料和水等的含菌指數或污染程度的檢測。這種方法主要是將待測樣品經適當稀釋之后,其中的微生物充分分散成單個細胞,取一定量的稀釋樣液接種到平板上,經過培養,由每個單細胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落,即一個單菌落應代表原樣品中的一個單細胞。這種方法的優勢在于可以獲得活菌的信息。
常用的有平板菌落計數法,是根據每個活的細菌能長出一個菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋,然后將定量的稀釋液進行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數的方法,也是目前上許多國家所采用的方法。使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進行計數,過多或過少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
一般選擇每個平板上長有30—300個菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。同一稀釋度的三個重復對照的菌落數不應相差很大,否則表示試驗不。實際工作中同一稀釋度重復對照平板不能少于三個,這樣便于數據統計,減少誤差。由10-4、10-5、10-6三個稀釋度計算出的每毫升菌液中菌落形成單位數也不應相差太大。
平板菌落計數法,所選擇倒平板的稀釋度是很重要的。一般以三個連續稀釋度中的第二個稀釋度倒平板培養后所出現的平均菌落數在50個左右為好,否則要適當增加或減少稀釋度加以調整。
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