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使用全自動菌落計數儀進行工作時需要注意什么
更新時間:2018-08-28 文章更新于2018-08-28  點擊次數:1480次
        菌落總數是指食品經過處理,在一定條件下培養后,所得1 g或1 ml檢樣中所含細菌菌落總數。菌落總數主要作為判別食品被污染程度的標志,也可以應用這一方法觀察細菌在食品中繁殖的動態,以便對被檢樣品進行衛生學評價時提供依據。菌落總數并不表示樣品中實際存在的所有細菌總數,菌落總數并不能區分其中細菌的種類,所以有時被稱為雜菌數,需氧菌數等。
  全自動菌落計數儀檢樣稀釋及培養
  1.  以無菌操作,將檢樣25 g(或25 mL)剪碎以后,放于含有225 mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預先置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后,置滅菌均質器中以8 000 r/min—1 0000 r/mln的速度處理1 min做成1:10的均勻稀釋液。
  2.  用1 mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,沿管劈徐徐注入臺有9 mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(注意吸管不要觸及管內稀釋液,下同),振搖試管混合均勻,做成1:100的稀釋液。
  3.  另取1 mL的滅菌吸管,按上項操作順序作10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次,即換用1支1 mL滅菌吸管。
  4.  根據食品衛生標準要求或對檢樣污染情況的估計,選擇2—3個適宜稀釋度,分別在作10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內,每個稀釋度作兩個平皿。
  5.  稀釋液移入平皿后,應及時將涼至46℃營養瓊脂培養基[可放置在(45土1) ℃水浴鍋內保溫注入平皿15 mI一20 mL,并轉動平皿位混合均勻,同時將營養瓊脂培養基傾入加有1 mL稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內作空白對照。
  6.  待瓊脂凝固后,翻轉平板,置(36土1) ℃恒溫箱內培養(48土2) h取出板內菌落數目,乘以稀釋倍數,即得I g(1 mL)樣品所含菌落總數。
  三、菌落計算方法
  1.  平板菌落數的選擇
  選取菌落數在30一300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板,選取兩個平扳平均數.其中一個平板有較大片狀菌落生長時.則不宜采用,而應以無片菌落生長的平板計數作為該稀釋度的菌落數。若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布2 fB均勻,可計算半個平板后乘2 U代表整個平皿菌落數。
  2.  稀釋度的選擇
  (1)應選擇平均菌落數在30一300之間的稀釋度,乘以稀釋倍效,報告之(見表5-2例1)。
  (2)若有兩個稀釋度,其生長的菌落數均在30一300之間,則視二者之比如何來決定。若其比值小應報告其平均數:若比值大于2,則報告其中較小的數字(見表5-2例2、例3)。
  (3)若所有稀釋度的平均菌落數均大于300,則應按稀釋度高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表5-2例4)。
  (4)若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度低的平均菌范數乘以稀釋倍數報告之(見表5-2例5)。
  (5)若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以低稀釋倍數報告之〔見表5-2例6〕。
  (6)若所有稀釋度的平均菌落數均不在30一300之間,其中一部分大于300或小于30時,近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表5-2例7)。
  3.  菌落數的報告
  菌落數在100以剛t1按其實有數報告;大于100時,用二位有效數字,在二位有效數字后面的數字,以四舍五入方法計算。為了縮短數字后面的0的個數,可用10的指數來表示,見表5-2“報告方式”一欄。
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  注意事項
  1.  平板培養計數法只能檢出生長的活菌,不能檢出樣品中全部的細菌數,總是比實際生存在食品中的細菌數要少,這是因為食品中存在多種細菌,它們的生活特性各異,不可能在統一培養條件下全部生長出來。但是,仍能借此評定整個食品被細菌污染的程度,所以目前一般食品的衛生檢驗中都普遍采用這種方法。
  2.  平板菌落計數測定食品中的菌落總數,一般均采用中溫培養,特別是已屬于直接供食用的制成食品,因為這些食品衛生的要求,是嚴格防止消化道傳染病病原菌和食物中毒病原菌污染,這些病原菌都屬于嗜溫性菌,因而測定細菌數時,采用中溫培養是比較合理的。
  以上是菌落檢樣的操作步驟及使用注意事項,當然使用全自動菌落計數儀的話更加方便。

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